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domingo, 23 de febrero de 2014

PRACTICA No.2 “Análisis comparativo de muestras de espermatozoides “

PRACTICA No.2
“Análisis comparativo de muestras de espermatozoides “
Material.
·         2 microscopios ópticos
·         5 porta objetos
·         5 cubreobjetos.
·         1Vaso de precipitado de 50ml.
·         1 Pipeta Pasteur con bulbo.
·         Muestra de espermatozoides.
·         Azul de metileno.
Procedimiento

1.    Se coloca la muestra en el vaso de precipitado de 50ml.
2.    Posteriormente con ayuda de la pipeta Pasteur con bulbo colocamos una gota de semen sobre el porta objetos.
3.    En otro porta objetos colocamos una gota de semen y además una gota de azul de metileno.
4.    Colocamos el cubre objetos en ambos portaobjetos.
5.    Observamos la muestra al microscopio con los objetivos de  10x y 40x.

INTRODUCCION

GAMETOGÉNESIS 

La gametogénesis es el proceso de maduración de los gametos tanto masculinos como femeninos. En este proceso se reduce a la mitad (meiosis) el número de cromosomas. La formación de los gametos femeninos y masculinos acontece durante la vida intraembrionaria, pero variará en la mujer y en el hombre. 
La gametogénesis femenina se llama ovogénesis, y se caracteriza por que se inicia y finaliza en la vida intraembrionaria, nunca más habrá nueva formación de ovogonias, su número irá reduciéndose a lo largo de la vida hasta la menopausia, de cada ovocito sólo se produce un óvulo y un corpúsculo polar no fertilizable, no existe ninguna fase final de maduración como en la espermatogénesis y todos los óvulos maduros serán portadores de un gonosoma X.

La gametogénesis masculina se llama espermatogénesis, que continua durante toda la vida del varón tras la pubertad, de una espermatogonia proceden 4 espermatozoides fecundantes y hay una fase de espermátide que debe madurar hasta la formación del espermatozoide maduro.
En gametogénesis animales multicelulares esta se lleva a cabo en los órganos especiales de las glándulas sexuales o gónadas (ovarios, testículos, glándulas sexuales hermafroditas), y se lleva a cabo en tres etapas básicas.

La primera etapa es la reproducción del sexo primordial. Gametogonia (espermatogonias y ovogonias) por medio de una serie de mitosis consecutivas 

La segunda etapa es el crecimiento y la maduración de estas células, que ahora se llaman gametocitos (espermatocitos y ovocitos), que, al igual que la gametogonia, poseen una completa (por lo general diploide) de cromosomas. En este punto, el acontecimiento crucial de la gametogénesis en los animales se produce: la división de los gametocitos por medio de la meiosis, lo que provoca una reducción (reducción a la mitad) del número de cromosomas en estas células y su conversión en células haploides. 

La tercera etapa es la formación de espermatozoides (o espermatozoides) y células de huevo, en esta fase los óvulos adquieren una serie de membranas embrionarias, mientras que los espermatozoides adquieren flagelos que les permiten moverse. En la meiosis muchas especies animales y la formación del huevo se completaron en la hembra después de la penetración del espermatozoide en el citoplasma del ovocito pero antes de la fusión de los núcleos del espermatozoide y el óvulo.

ESPERMATOGÉNESIS
La espermatogénesis es el proceso mediante el cual se desarrollan los gametos masculinos. Inicia en la
adolescencia y se lleva a cabo en los túbulos seminíferos. Las células en los túbulos seminíferos se disponen
alrededor del lúmen, las espermatogonias se encuentran en la base del epitelio y proliferan por mitosis. Existen
dos tipos de espermatogonias las tipo A y B. Las espermatogonias tipo A se encargan de dividirse y dan origen
a espermatogonias tipo B que son las que van a diferenciarse en espermatozoides. Las descendientes de las
espermatogonias tipo B son las que entran a la primera diversión meiótica duplicando su material genético y
son los espermatocitos primarios; siendo su material genético 2n4c. Cuando se completa la primera división
meiótica el resultado son dos espermatocitos secundarios cuyo complemento cromosómico es 1n2c. Por cada
espermatocito secundario que entra a meiosis II se obtienen dos espermátides, que madurarán para formar
espermatozoides.

Las células de Sertoli se encuentran también en los túbulos seminíferos y se encargan de dar sostén y nutrir a
los gametos en diferenciación, de igual manera forman la barrera hematotesticular, necesaria para proveer un
sitio de inmunoprivilegio para los gametos. Desde los espermatocitos primarios hasta los espermatozoides en
el proceso de diferenciación se hacen acreedores de proteínas antigénicas diferentes a las del resto de las
células corporales, por lo que necesitan estar en un lugar fuera del alcance del sistema inmunológico para no
ser víctimas del mismo.

La maduración de los espermátides en espermatozoides es un proceso denominado espermiogénesis. Los
eventos más importantes de éste proceso serán nombrados a continuación:
1. Reducción del tamaño nuclear.
2. Condensación del material genético por la sustitución de las histonas por protaminas.
3. Formación de la vesícula acrosómica a partir del aparato de golgi.
4. Crece un flagelo a partir de la región centriolar.
5. Las mitocondrias se acomodan en la parte proximal del flagelo.
6. El citoplasma se reduce y se separa formando el cuerpo residual.


El tiempo total de duración del proceso de espermatogénesis y espermiogénesis es de 64 días. La maduración
bioquímica se lleva a cabo en el epidídimo y posteriormente cuando los espermatozoides entran en contacto
con el líquido seminal y el prostático.
El porcentaje de espermatozoides anómalos maduros es del 10% y si se eleva por encima del 20% es probable
que exista repercusión en la fertilidad del individuo.

MORFOLOGIA DEL ESPERMATOZOIDE


CARACTERISTICAS DEL SEMEN HUMANO
·         El volumen promedio de semen de una eyaculación es de 1,5 a 4 mililitros, con un máximo de 5 ml tras un periodo de abstinencia de 3 a 7 días.5 Depende mucho de la abstinencia sexual previa y del nivel de excitación durante la actividad sexual.
·         El cuerpo humano elimina por sí mismo el semen almacenado que no se evacúa mediante la estimulación de los genitales. Si no se eyacula durante un tiempo, se suelen producir poluciones nocturnas.
·         El color del semen es normalmente blancuzco o blanco lechoso o levemente amarillento, por las flavinas provenientes de la vesícula seminal. Si el líquido eyaculado presenta un color anaranjado o rojizo, es posible que contenga sangre, signo que se conoce comohematospermia, que puede indicar un trastorno urológico.
·         El semen suele tener una consistencia de coágulo, debido a la facilidad de solidificación que posee gracias al fosfato de espermina y otras proteínas similares al fibrinógeno. Es frecuente la aparición de grumos más sólidos, pero ello no es indicativo de ninguna clase de problemas.
·         El olor es peculiar y variable en cada individuo, en función de múltiples factores. Se trata de características que incluyen un fuerte componente subjetivo y emocional. Para unas personas es desagradable y para otras es excitante. Algunas personas reconocen un leve sabor dulce y afrutado, debido a las proteínas alcalinas. El aroma puede ser muy intenso.
·         El pH del semen es de alrededor de 7,5. Esta ligera alcalinidad favorece a los espermatozoides cuando se encuentran en la vagina, donde el pH es ácido.
·         Menos del 10% del volumen del semen de una eyaculación corresponde a los espermatozoides.
·         Más del 90% del volumen del semen de una eyaculación corresponde al líquido seminal.
·         La densidad normal de los espermatozoides en el semen varía de 50 a 150 millones por mililitro, por lo que cada eyaculación contiene entre 20 a 150 millones por centímetro cúbico de espermatozoides.
Para que se produzca la fecundación del óvulo, el semen debe contener más de 20 millones de espermatozoides por mililitro.
·         El semen contiene algunas otras células, desprendidas del epitelio de los conductos excretores y de la uretra, o bien procedentes del sistema inmune, como los linfocitos.
·         En caso de infección del organismo, el semen puede llegar a contener altas concentraciones de virus o gérmenes como, por ejemplo, el VIH (que provoca el sida), por lo que el método de protección más efectivo es el de barrera (condón o preservativo).
·         Debido a la composición del semen, en condiciones adecuadas, los espermatozoides pueden permanecer vivos fuera del organismo durante varios días. También sobreviven durante cierto tiempo en los conductos excretores después de la muerte. Se han llegado a encontrar gametos masculinos vivos en la trompa de Falopio y en el útero de la mujer varios días después del coito. Pueden almacenarse en estado congelado con nitrógeno líquido durante meses o años, ya que mantienen su capacidad fertilizante tras la congelación o criopreservación. Debido a esta última característica, es posible la inseminación artificial y la fecundación in vitro con semen congelado o criopreservado. Muchas personas con cáncer testicular han podido tener descendencia posteriormente, criopreservando su semen antes del tratamiento.


Composición del semen
Menos de un 10% del volumen del semen de una eyaculación corresponde a los espermatozoides, y más del 90% al líquido seminal. La densidad de espermatozoides en el semen varía de 50 a 150 millones por mililitro,5 por lo que cada eyaculación contiene entre 200 y 400 millones de ellos.
La vesícula seminal aporta entre el 40% y el 60% del volumen del semen y contiene principalmente:6
·         fructosa
·         Prostaglandinas (E2, A, B)7
·         aminoácidos
·         fósforo
·         potasio
·         hormonas
La próstata aporta de 15% a 30% del plasma seminal, es un líquido rico en:
·         ácido cítrico
·         colesterol
·         fosfolípidos
·         carnitina
·         fosfatasa alcalina
·         calcio
·         sodio
·         zinc
·         potasio
·         enzimas para la separación de las proteínasfibrolisina (una enzima que reduce la sangre y las fibras del tejido) y fibrinogenasa, principalmente.
El último elemento que se agrega al semen es un fluido que secretan las glándulas uretrales (Glándulas uretrales de Cowper y Littré)7(las glándulas Cowper están ubicadas bajo la próstata y aportan la secreción mucosa al semen)8 y bulbouretrales, que representan el 3% al 6% del semen, segrega una proteína espesa, clara y lubricante conocida como moco.






Alteraciones morfológicas del espermatozoide
A nivel de la cabeza:
(1) Alteraciones numéricas:
(A) Espermatozoides sin cabeza, enucleados, en cabeza de alfiler o decapitados: Se trata de espermatozoides acéfalos, por tanto sin su material genético. Estos espermatozoides cuando se
Observan “in vitro” pueden presentar movilidad
Progresiva.

(B) Espermatozoides Bicéfalos: Espermatozoides
Con dos cabezas y un solo flagelo, normalmente
La pieza intermedia aparece engrosada como se ilustra en la

(2) Alteraciones en la forma:
(A) Espermatozoides con cabezas alargadas o “tapering”
 En este caso la cabeza de los
Espermatozoides posee la forma de una elipse en la que existe un marcado predomino del eje longitudinal sobre el eje transversal
(B) Espermatozoides con cabezas redondas
A diferencia del caso anterior, aquí ambos ejes
Tienden a ser similares lo que le da un aspecto esferoide
A nivel de la pieza de conexión:
Espermatozoides con implantación axial anómala
Del flagelo .En estos casos observamos una
Estrangulación a nivel de la pieza intermedia, que se
Une a la fosa de implantación formando un ángulo de
45-90º con respecto al eje longitudinal de la cabeza.
A nivel de la cola o flagelo:




(1) Alteraciones numéricas
(A) Espermatozoides sin flagelo
(B) Espermatozoides con flagelos múltiples

(2) Alteraciones en la forma, a nivel de la pieza intermedia
(A) Espermatozoides con pieza intermedia marcadamente engrosada
(B) Espermatozoides con persistencia de gota

(3) Alteraciones de la forma a nivel del resto del flagelo
(A) Espermatozoides con enrollamiento total de la cola con o sin restos citoplasmáticos englobándola
(B) Espermatozoides con enrollamiento parcial de cola
(C) Espermatozoides con flagelos truncados


Anomalías de la cabeza
Espermatozoides con cabezas redondas
Espermatozoides macrocéfalos o macro nucleares

Anomalías de la pieza de conexión
Espermatozoides sin cabeza
Espermatozoides con implantación axial del flagelo
Anomalías de la pieza intermedia
Espermatozoides con engrosamiento de la pieza intermedia
Anomalías del flagelo
Espermatozoides con flagelos rudimentario


                                                                                                                            
Conceptos.
ü  Motilidad espermática: Es la habilidad de moverse espontánea e independientemente, la motilidad clasifica la calidad de la forma de desplazarse de los espermatozoides.
ü  Viabilidad espermática: La prueba de VIABILIDAD nos permite discriminar entre espermatozoides inmóviles vivos y espermatozoides inmóviles muertos. Para realizarla se pone el semen en contacto con una solución de eosina. Debido a las reacciones que tiene lugar a nivel de la membrana de las células, tanto los espermatozoides muertos como los leucocitos se tiñen de rojo, mientras que lOs espermatozoides vivos y las células precursoras permanecen de color original. De acuerdo a los criterios de la O.M.S la cantidad de espermatozoides inmóviles vivos debe ser mayor a un 50%.
ü  Cuenta espermática: Nos permite identificar el número de espermatozoides por mililitro. El conteo de espermatozoides varía de 20 a 150 millones por mililitro.
ü  Viscosidad de la muestra de semen: El semen licuado debe ser ligeramente más viscoso que el agua. Para examinar la viscosidad, se comprueba la formación de hilos en la muestra. Si la muestra es altamente viscosa, puede deberse a una disfunción prostática, eyaculación frecuente o al estado psicológico del paciente. Este aumento de la viscosidad no supone una causa directa de infertilidad, únicamente debe tenerse en cuenta a la hora de determinar el resto de parámetros de un seminograma. El aumento de viscosidad seminal dificulta la movilidad de los espermatozoides y puede ser causa de astenozoospermia

ü  Azoospermia: Es un trastorno orgánico en el cual el hombre no tiene un nivel mensurable de espermatozoides en su semen. Se asocia con muy bajos niveles de fertilidad
ü  Oligospermia: Hace referencia a un semen con poca calidad: una baja cantidad de espermatozoides en el semen.[ La oligospermia está relacionada con muestras que llegan al menos a 20 millones de espermatozoides por mililitro de eyaculado

ü  Teratospermia: Es un parámetro que nos indica si los espermatozoides procedentes del semen tienen alteraciones morfológicas que pueden afectar su capacidad reproductiva.

    RESULTADOS







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