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domingo, 23 de febrero de 2014

PRACTICA No.2 “Análisis comparativo de muestras de espermatozoides “

PRACTICA No.2
“Análisis comparativo de muestras de espermatozoides “
Material.
·         2 microscopios ópticos
·         5 porta objetos
·         5 cubreobjetos.
·         1Vaso de precipitado de 50ml.
·         1 Pipeta Pasteur con bulbo.
·         Muestra de espermatozoides.
·         Azul de metileno.
Procedimiento

1.    Se coloca la muestra en el vaso de precipitado de 50ml.
2.    Posteriormente con ayuda de la pipeta Pasteur con bulbo colocamos una gota de semen sobre el porta objetos.
3.    En otro porta objetos colocamos una gota de semen y además una gota de azul de metileno.
4.    Colocamos el cubre objetos en ambos portaobjetos.
5.    Observamos la muestra al microscopio con los objetivos de  10x y 40x.

INTRODUCCION

GAMETOGÉNESIS 

La gametogénesis es el proceso de maduración de los gametos tanto masculinos como femeninos. En este proceso se reduce a la mitad (meiosis) el número de cromosomas. La formación de los gametos femeninos y masculinos acontece durante la vida intraembrionaria, pero variará en la mujer y en el hombre. 
La gametogénesis femenina se llama ovogénesis, y se caracteriza por que se inicia y finaliza en la vida intraembrionaria, nunca más habrá nueva formación de ovogonias, su número irá reduciéndose a lo largo de la vida hasta la menopausia, de cada ovocito sólo se produce un óvulo y un corpúsculo polar no fertilizable, no existe ninguna fase final de maduración como en la espermatogénesis y todos los óvulos maduros serán portadores de un gonosoma X.

La gametogénesis masculina se llama espermatogénesis, que continua durante toda la vida del varón tras la pubertad, de una espermatogonia proceden 4 espermatozoides fecundantes y hay una fase de espermátide que debe madurar hasta la formación del espermatozoide maduro.
En gametogénesis animales multicelulares esta se lleva a cabo en los órganos especiales de las glándulas sexuales o gónadas (ovarios, testículos, glándulas sexuales hermafroditas), y se lleva a cabo en tres etapas básicas.

La primera etapa es la reproducción del sexo primordial. Gametogonia (espermatogonias y ovogonias) por medio de una serie de mitosis consecutivas 

La segunda etapa es el crecimiento y la maduración de estas células, que ahora se llaman gametocitos (espermatocitos y ovocitos), que, al igual que la gametogonia, poseen una completa (por lo general diploide) de cromosomas. En este punto, el acontecimiento crucial de la gametogénesis en los animales se produce: la división de los gametocitos por medio de la meiosis, lo que provoca una reducción (reducción a la mitad) del número de cromosomas en estas células y su conversión en células haploides. 

La tercera etapa es la formación de espermatozoides (o espermatozoides) y células de huevo, en esta fase los óvulos adquieren una serie de membranas embrionarias, mientras que los espermatozoides adquieren flagelos que les permiten moverse. En la meiosis muchas especies animales y la formación del huevo se completaron en la hembra después de la penetración del espermatozoide en el citoplasma del ovocito pero antes de la fusión de los núcleos del espermatozoide y el óvulo.

ESPERMATOGÉNESIS
La espermatogénesis es el proceso mediante el cual se desarrollan los gametos masculinos. Inicia en la
adolescencia y se lleva a cabo en los túbulos seminíferos. Las células en los túbulos seminíferos se disponen
alrededor del lúmen, las espermatogonias se encuentran en la base del epitelio y proliferan por mitosis. Existen
dos tipos de espermatogonias las tipo A y B. Las espermatogonias tipo A se encargan de dividirse y dan origen
a espermatogonias tipo B que son las que van a diferenciarse en espermatozoides. Las descendientes de las
espermatogonias tipo B son las que entran a la primera diversión meiótica duplicando su material genético y
son los espermatocitos primarios; siendo su material genético 2n4c. Cuando se completa la primera división
meiótica el resultado son dos espermatocitos secundarios cuyo complemento cromosómico es 1n2c. Por cada
espermatocito secundario que entra a meiosis II se obtienen dos espermátides, que madurarán para formar
espermatozoides.

Las células de Sertoli se encuentran también en los túbulos seminíferos y se encargan de dar sostén y nutrir a
los gametos en diferenciación, de igual manera forman la barrera hematotesticular, necesaria para proveer un
sitio de inmunoprivilegio para los gametos. Desde los espermatocitos primarios hasta los espermatozoides en
el proceso de diferenciación se hacen acreedores de proteínas antigénicas diferentes a las del resto de las
células corporales, por lo que necesitan estar en un lugar fuera del alcance del sistema inmunológico para no
ser víctimas del mismo.

La maduración de los espermátides en espermatozoides es un proceso denominado espermiogénesis. Los
eventos más importantes de éste proceso serán nombrados a continuación:
1. Reducción del tamaño nuclear.
2. Condensación del material genético por la sustitución de las histonas por protaminas.
3. Formación de la vesícula acrosómica a partir del aparato de golgi.
4. Crece un flagelo a partir de la región centriolar.
5. Las mitocondrias se acomodan en la parte proximal del flagelo.
6. El citoplasma se reduce y se separa formando el cuerpo residual.


El tiempo total de duración del proceso de espermatogénesis y espermiogénesis es de 64 días. La maduración
bioquímica se lleva a cabo en el epidídimo y posteriormente cuando los espermatozoides entran en contacto
con el líquido seminal y el prostático.
El porcentaje de espermatozoides anómalos maduros es del 10% y si se eleva por encima del 20% es probable
que exista repercusión en la fertilidad del individuo.

MORFOLOGIA DEL ESPERMATOZOIDE


CARACTERISTICAS DEL SEMEN HUMANO
·         El volumen promedio de semen de una eyaculación es de 1,5 a 4 mililitros, con un máximo de 5 ml tras un periodo de abstinencia de 3 a 7 días.5 Depende mucho de la abstinencia sexual previa y del nivel de excitación durante la actividad sexual.
·         El cuerpo humano elimina por sí mismo el semen almacenado que no se evacúa mediante la estimulación de los genitales. Si no se eyacula durante un tiempo, se suelen producir poluciones nocturnas.
·         El color del semen es normalmente blancuzco o blanco lechoso o levemente amarillento, por las flavinas provenientes de la vesícula seminal. Si el líquido eyaculado presenta un color anaranjado o rojizo, es posible que contenga sangre, signo que se conoce comohematospermia, que puede indicar un trastorno urológico.
·         El semen suele tener una consistencia de coágulo, debido a la facilidad de solidificación que posee gracias al fosfato de espermina y otras proteínas similares al fibrinógeno. Es frecuente la aparición de grumos más sólidos, pero ello no es indicativo de ninguna clase de problemas.
·         El olor es peculiar y variable en cada individuo, en función de múltiples factores. Se trata de características que incluyen un fuerte componente subjetivo y emocional. Para unas personas es desagradable y para otras es excitante. Algunas personas reconocen un leve sabor dulce y afrutado, debido a las proteínas alcalinas. El aroma puede ser muy intenso.
·         El pH del semen es de alrededor de 7,5. Esta ligera alcalinidad favorece a los espermatozoides cuando se encuentran en la vagina, donde el pH es ácido.
·         Menos del 10% del volumen del semen de una eyaculación corresponde a los espermatozoides.
·         Más del 90% del volumen del semen de una eyaculación corresponde al líquido seminal.
·         La densidad normal de los espermatozoides en el semen varía de 50 a 150 millones por mililitro, por lo que cada eyaculación contiene entre 20 a 150 millones por centímetro cúbico de espermatozoides.
Para que se produzca la fecundación del óvulo, el semen debe contener más de 20 millones de espermatozoides por mililitro.
·         El semen contiene algunas otras células, desprendidas del epitelio de los conductos excretores y de la uretra, o bien procedentes del sistema inmune, como los linfocitos.
·         En caso de infección del organismo, el semen puede llegar a contener altas concentraciones de virus o gérmenes como, por ejemplo, el VIH (que provoca el sida), por lo que el método de protección más efectivo es el de barrera (condón o preservativo).
·         Debido a la composición del semen, en condiciones adecuadas, los espermatozoides pueden permanecer vivos fuera del organismo durante varios días. También sobreviven durante cierto tiempo en los conductos excretores después de la muerte. Se han llegado a encontrar gametos masculinos vivos en la trompa de Falopio y en el útero de la mujer varios días después del coito. Pueden almacenarse en estado congelado con nitrógeno líquido durante meses o años, ya que mantienen su capacidad fertilizante tras la congelación o criopreservación. Debido a esta última característica, es posible la inseminación artificial y la fecundación in vitro con semen congelado o criopreservado. Muchas personas con cáncer testicular han podido tener descendencia posteriormente, criopreservando su semen antes del tratamiento.


Composición del semen
Menos de un 10% del volumen del semen de una eyaculación corresponde a los espermatozoides, y más del 90% al líquido seminal. La densidad de espermatozoides en el semen varía de 50 a 150 millones por mililitro,5 por lo que cada eyaculación contiene entre 200 y 400 millones de ellos.
La vesícula seminal aporta entre el 40% y el 60% del volumen del semen y contiene principalmente:6
·         fructosa
·         Prostaglandinas (E2, A, B)7
·         aminoácidos
·         fósforo
·         potasio
·         hormonas
La próstata aporta de 15% a 30% del plasma seminal, es un líquido rico en:
·         ácido cítrico
·         colesterol
·         fosfolípidos
·         carnitina
·         fosfatasa alcalina
·         calcio
·         sodio
·         zinc
·         potasio
·         enzimas para la separación de las proteínasfibrolisina (una enzima que reduce la sangre y las fibras del tejido) y fibrinogenasa, principalmente.
El último elemento que se agrega al semen es un fluido que secretan las glándulas uretrales (Glándulas uretrales de Cowper y Littré)7(las glándulas Cowper están ubicadas bajo la próstata y aportan la secreción mucosa al semen)8 y bulbouretrales, que representan el 3% al 6% del semen, segrega una proteína espesa, clara y lubricante conocida como moco.






Alteraciones morfológicas del espermatozoide
A nivel de la cabeza:
(1) Alteraciones numéricas:
(A) Espermatozoides sin cabeza, enucleados, en cabeza de alfiler o decapitados: Se trata de espermatozoides acéfalos, por tanto sin su material genético. Estos espermatozoides cuando se
Observan “in vitro” pueden presentar movilidad
Progresiva.

(B) Espermatozoides Bicéfalos: Espermatozoides
Con dos cabezas y un solo flagelo, normalmente
La pieza intermedia aparece engrosada como se ilustra en la

(2) Alteraciones en la forma:
(A) Espermatozoides con cabezas alargadas o “tapering”
 En este caso la cabeza de los
Espermatozoides posee la forma de una elipse en la que existe un marcado predomino del eje longitudinal sobre el eje transversal
(B) Espermatozoides con cabezas redondas
A diferencia del caso anterior, aquí ambos ejes
Tienden a ser similares lo que le da un aspecto esferoide
A nivel de la pieza de conexión:
Espermatozoides con implantación axial anómala
Del flagelo .En estos casos observamos una
Estrangulación a nivel de la pieza intermedia, que se
Une a la fosa de implantación formando un ángulo de
45-90º con respecto al eje longitudinal de la cabeza.
A nivel de la cola o flagelo:




(1) Alteraciones numéricas
(A) Espermatozoides sin flagelo
(B) Espermatozoides con flagelos múltiples

(2) Alteraciones en la forma, a nivel de la pieza intermedia
(A) Espermatozoides con pieza intermedia marcadamente engrosada
(B) Espermatozoides con persistencia de gota

(3) Alteraciones de la forma a nivel del resto del flagelo
(A) Espermatozoides con enrollamiento total de la cola con o sin restos citoplasmáticos englobándola
(B) Espermatozoides con enrollamiento parcial de cola
(C) Espermatozoides con flagelos truncados


Anomalías de la cabeza
Espermatozoides con cabezas redondas
Espermatozoides macrocéfalos o macro nucleares

Anomalías de la pieza de conexión
Espermatozoides sin cabeza
Espermatozoides con implantación axial del flagelo
Anomalías de la pieza intermedia
Espermatozoides con engrosamiento de la pieza intermedia
Anomalías del flagelo
Espermatozoides con flagelos rudimentario


                                                                                                                            
Conceptos.
ü  Motilidad espermática: Es la habilidad de moverse espontánea e independientemente, la motilidad clasifica la calidad de la forma de desplazarse de los espermatozoides.
ü  Viabilidad espermática: La prueba de VIABILIDAD nos permite discriminar entre espermatozoides inmóviles vivos y espermatozoides inmóviles muertos. Para realizarla se pone el semen en contacto con una solución de eosina. Debido a las reacciones que tiene lugar a nivel de la membrana de las células, tanto los espermatozoides muertos como los leucocitos se tiñen de rojo, mientras que lOs espermatozoides vivos y las células precursoras permanecen de color original. De acuerdo a los criterios de la O.M.S la cantidad de espermatozoides inmóviles vivos debe ser mayor a un 50%.
ü  Cuenta espermática: Nos permite identificar el número de espermatozoides por mililitro. El conteo de espermatozoides varía de 20 a 150 millones por mililitro.
ü  Viscosidad de la muestra de semen: El semen licuado debe ser ligeramente más viscoso que el agua. Para examinar la viscosidad, se comprueba la formación de hilos en la muestra. Si la muestra es altamente viscosa, puede deberse a una disfunción prostática, eyaculación frecuente o al estado psicológico del paciente. Este aumento de la viscosidad no supone una causa directa de infertilidad, únicamente debe tenerse en cuenta a la hora de determinar el resto de parámetros de un seminograma. El aumento de viscosidad seminal dificulta la movilidad de los espermatozoides y puede ser causa de astenozoospermia

ü  Azoospermia: Es un trastorno orgánico en el cual el hombre no tiene un nivel mensurable de espermatozoides en su semen. Se asocia con muy bajos niveles de fertilidad
ü  Oligospermia: Hace referencia a un semen con poca calidad: una baja cantidad de espermatozoides en el semen.[ La oligospermia está relacionada con muestras que llegan al menos a 20 millones de espermatozoides por mililitro de eyaculado

ü  Teratospermia: Es un parámetro que nos indica si los espermatozoides procedentes del semen tienen alteraciones morfológicas que pueden afectar su capacidad reproductiva.

    RESULTADOS







domingo, 16 de febrero de 2014





EMBRIOLOGÍA HUMANA



 PROFESOR: Candelas Villagómez Daniel



ALUMNOS: Martinez San Juan Jorge Luis
Hernández Báez Christian Kevin
Sandra Karen Ramos Gonzales
Pérez Mendoza Karla Monserrat

GRUPO: 1PM3

EQUIPO: 1” EMBRIOPARTEROS”

MATERIA: EMBRIOLOGÍA HUMANA

PRACTICA A ENTRGAR: HISTOLOGÍA DEL  TESTÍCULO Y OVARIO



MATERIALES.
·         Microscopio.
·         Preparacion de testiculo y ovario.
·         Imágenes de cortes histologicos de  testiculo y ovario.

PROCEDIMIENTO.
Preparacion de testiculo.
1)     Colocamos la preparacion de testiculo sobre la platina del microscopio para iniciar las observacion.
2)     Primero enfocamos a 10x y esquematizamos lo observado.
3)     Posteriormente enfocamos a 40x y enfocamos lo observado.
4)     Comparamos nuestras imágenes de los cortes histologicos y lo observado en el microscopio.
5)     Con ayuda del profesor identificamos las estructuras morfologicas en dicha preparacion.

Preparacion de ovario.
1)     Colocamos la preparacion de ovario sobre la platina del microscopio para iniciar las observacion.
2)     Primero enfocamos a 10x y esquematizamos lo observado.
3)     Posteriormente enfocamos a 40x y enfocamos lo observado.
4)     Comparamos nuestras imágenes de los cortes histologicos y lo observado en el microscopio.
5)     Con ayuda del profesor identificamos las estructuras morfologicas en dicha preparacion.










INTRODUCCION
La gonadogénesis se refiere principalmente al desarrollo de las gónadas, donde las células del rudimiento gonadal se diferencian. El tipo de diferenciación que toma el rudimiento determina el desarrollo sexual del organismo, ya que este tiene dos opciones al poder desarrollarse como ovario o como testículo.
Los rudimentos de la gónada aparecen en el mesodermo intermedio durante la cuarta semana de desarrollo, y a partir de esta semana entra en un estadio bipotencial o de indiferenciación en el que ocurre el desarrollo de la gónada y en donde al estar indiferenciada no posee ni características femeninas ni masculinas hasta la séptima semana.
Durante este estadio el epitelio de la cresta genital, el cual conforma la parte ventral del rudimento prolifera hasta expandirse hasta el tejido conectivo mesenquimático. Las capas epiteliales que se forman generan los cordones sexuales; los cuales serán rodeados por las células germinales que migran hacia la gónada en la sexta semana de desarrollo. Al entrar en el periodo de determinación sexual del organismo, si el feto es XY los cordones sexuales ya formados seguirán proliferándose y a la vez expandiéndose hacia el tejido conectivo, lo que formara una red de cordones sexuales internos y en un extremo la rete tesis. A los cordones sexuales se les denominara ahora cordones testiculares, estos pierden su contacto con el epitelio superficial al cual se mantenían conectados, por lo tanto cuando entran las células germinales a la gónada masculina se desarrollaran hacia estos cordones. Esto posibilita que los cordones sexuales hagan de inhibidor de la meiosis de las células germinales, que no la iniciaran hasta comenzar la pubertad. Al no poder entrar en meiosis las células germinales comienzas a desarrollarse como células germinales masculinas las cuales hacen que las células del cordón testicular se diferencian a células de Sertoli gracias a un factor que ha sido secretado. Las células de Sertoli están ubicadas en los túbulos seminíferos y serán de gran importancia durante la espermatogénesis..
Los túbulos seminíferos se forman gracias al ahuecamiento de los cordones testiculares durante la pubertad, a la periferia de estos túbulos migran las células germinales y estos comienzan a diferenciarse hacia espermatozoides. Cuando los túbulos están maduros, los espermatozoides ya diferenciados son transportados desde el interior del testículo por medio de la rete testis que está unida a los conductillos eferentes. Estos conductos conectan al testículo al conducto de Wolf.
En el caso de ser el feto XX los cordones sexuales se degeneran y las células germinales se localizan cerca de la superficie externa de la gónada. El epitelio produce un nuevo grupo de cordones sexuales los cuales se localizan cerca de la superficie externa del órgano, los nuevos cordones son denominados cordones sexuales corticales los cuales son divididos en grupos donde cada uno de estos rodea una célula germinal. Las células germinales van a llegar a ser los gametos femeninos maduros y los cordones que las rodean se diferenciaran en las células de la granulosa. Por otro lado las células mesenquimáticas del ovario se diferencian en células tecales, las cuales junto con las células de la granulosa formaran los folículos que envuelven las células germinales y secretan hormonas esteroideas. Cada uno de estos folículos tendrá una solo célula germinal que entrara en meiosis para completar la diferenciación a tejido ovárico. Por otra parte la formación de las trompas de Falopio, útero, cuello uterino se da por la diferenciación del conducto de Müller.


Diferentes genes participan en la determinación del sexo de los organismos este es el caso de SRY (región del cromosoma Y determinante del sexo), el cual induce la formación testicular al ser requerido para la proliferación del epitelio y la migración de las células del mesonefro hacia las gónadas. Este actúa como un factor de transcripción que actúa para antagonizar la función de los represores del desarrollo masculino. La expresión de SRY esta seguida de varios sucesos como la activación de genes masculinos específicos, migración y proliferación celular.
En la regulación de SRY participa el isomorfo WT1 (-KTS) quien actúa tanto en su activación como en estabilidad de transcripción. Este isomorfo es importante en el desarrollo de las gónadas femeninas y masculinas, pero no es esencial en la determinación sexual masculina. La formación específica de la gónada masculina requiere del otro isomorfo WT1 (+KTS) el cual actúa incrementando la abundancia de transcritos de SYR. Otro gen involucrado en la inducción de formación de testículo es el SOX9 el cual es un gen autosómico involucrado en la activación de un gen que codifica para una hormona anti-Müller (AMH), la cual es secretada por las células de Sertoli y que causa regresión de los conductos Müller femeninos.



En el caso del desarrollo femenino, se conoce que una región del cromosoma X contiene un gen que codifica una proteína que compite contra el factor SRY y que es de gran importancia para direccionar el desarrollo del ovario. El gen Dax1 es expresado en las crestas genitales después de la expresión de SRY, pero sin embargo finalmente se expresa solamente en el rudimiento gonadal XX. Este gen es activado por el producto de un gen determinante del ovario Wnt4 el cual se expresa en la cresta genital aunque se esté en el estadio bipotencial y es mantenida mientras se comienzan a formar ovarios, aunque se expresa en ambos sexos al igual que Dax1. Wnt4 es de gran importancia para el desarrollo del sistema reproductivo y por ende del ovario, regular la morfogénesis del ducto Mulleriano, vascularización de la gónada en desarrollo y la migración de células sexuales específicas.















resultados
VISTA DEL CORTE HISTOLÓGICO DEL TESTICULO















VISTA DEL CORTE HISTOLOGICO DE OVARIO








REFERENCIA FOTOGRÁFICA DEL LABORATORIO



Visión 10x 


Visión de 40x de testículo




 Visión 10 x de ovario

Visión a 40 x de ovario


ANÁLISIS DE RESULTADOS
En esta práctica se diferenció las distintas estructuras de tejidos de testículo y ovario por medio de observación microscópica en lo cual se dio a conocer la relación de gametogénesis en los tejidos testicular y ovárico

CONCLUSIONES
En esta práctica se pudo diferenciar los tipos de células existentes en cada aparato reproductor (masculino y femenino); lo cual podemos concluir que cada célula sexual tiene su proceso único parta llevar acabo su reproducción ya sea por medio de ayudantes; las células de Sartori en espermatozoides y el folículo en el ovicito .





REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS